小朗課堂 | 實驗室核酸污染問題解決方案 2023-01-05
對于每天要跑PCR實驗的小伙伴來說,一根漂亮的擴增曲線絕對是他們的心情曲線,如果突然這根擴增曲線翹尾了,心情大概就是小朗最近就收到這樣一名用戶的反饋,她說在進行PCR實驗時,擴增曲線翹尾了......她的擴增曲線如下圖所示:如果你也被這樣的問題困擾,那么下面的內容絕對值得你收藏!擴增曲線翹尾是指在實驗結果中有曲線出現(xiàn)末尾起跳但是沒有完整擴增的現(xiàn)象,導致這個現(xiàn)象出現(xiàn)的原因深究下來主要是2點:1、目的基因濃度過低,CT值過高,導致曲線后移,這樣就會出現(xiàn)翹尾現(xiàn)象;2、在反應體系中沒有加入模板DNA的情況下,外源污染的核酸進入反應體系也會出現(xiàn)翹尾。如果是第一個原因,那么給目的基因增加濃度即可。如果是第
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